A transzfer (angol blot ) egy molekuláris biológiai és biokémiai technika , amely lehetővé teszi egy adott molekula ( DNS , RNS , fehérje stb.) Jelenlétét egy biológiai mintában (sejtkivonat, biológiai folyadék, tisztított frakció ...) . Az átvitel abból áll, hogy az elemezendő molekulákat szilárd hordozóra (például nitrocellulóz vagy nejlon membránra ) viszik át , adott esetben egy szétválasztási lépés, például gélelektroforézis után , majd egy speciális szonda ( DNS- fragmens vagy RNS, antitest , stb.) a kívánt cél. Az elemzett molekuláktól és az alkalmazott kimutatási módszerektől függően több változat létezik.
Ezeket a technikákat, amelyek első fejlesztései az 1970-es évek közepére nyúlnak vissza, még mindig rendszeresen alkalmazzák a kutatásban vagy a klinikán.
Az első molekulatranszfer technikát 1976-ban fejlesztette ki Edwin Southern . A genomi DNS- t denaturáltuk és levágtuk, majd a kapott fragmenseket elektroforézissel elválasztottuk . A membránra történő átvitel után a kimutatást radioaktív DNS- próbákkal végeztük .
Ezt a technikát azután más típusú molekulákhoz adaptálták: az RNS-hez és a fehérjékhez, majd újabban a lipidekhez vagy a molekulák közötti kölcsönhatások elemzéséhez.
Az interakciók átadásának és elemzésének fő technikáit a következő táblázat sorolja fel.
Műszaki | Vezetéknév | Molekulák | Találmány |
---|---|---|---|
Átruházás | Southern blot | DNS | 1975, Southern |
Northern blot | RNS | 1975, Awine és mtsai. | |
Western blot | Fehérje | 1979, Towbin és 1981, Burnette | |
A kölcsönhatások elemzése | Délnyugati folt | DNS-fehérjék | 1980, Bowen és mtsai. |
Elektroforetikus mozgáseltolódási vizsgálat | DNS-fehérjék | 1981, Garner & Revzin és 1981, Fried & Crothers | |
Északnyugati folt | RNS-fehérjék | 1984, Adams és mtsai. | |
Far-western blot | Fehérje-fehérje | 1994, Hummler és mtsai. |
Jelenleg más elemzési technikák kezdenek felváltani bizonyos transzfer technikákat. Például, PCR (1983) és microarray a DNS és az RNS elemzése .
A DNS- transzfert angol nyelvű Southern blot -ban hívják , tiszteletben a feltalálója előtt. A többi technikát az RNS- nek Northern blot , a fehérjéknek Western blot és a lipideknek távol-keleti blot- nak nevezzük (humoros módon a 4 sarkalatos pontra: angolul északra , délre , keletre és nyugatra ). Csak a Southern szó származik tulajdonnévből, és nagybetűvel jelenik meg.
Francia nyelven például a fehérjék esetében ajánlott a fehérje transzfer vagy a western transzfer kifejezések használata . A technikák angol nevét nagyon gyakran használják az irodalomban vagy a laboratóriumokban.
A blot kifejezés néha előfordul a blot fordításához (utalva a blot jelentés feladatának szó szerinti fordítására vagy a száradásra , a blot továbbadására ). Ez azonban kevéssé használt neologizmus .
Ezek a technikák általában 3 vagy 4 szakaszban zajlanak (az első szakasz, az elválasztás opcionális).