Triptofanáz

Triptofanáz A kép leírása, az alábbiakban szintén kommentálva Egy E. coli triptofanáz kristályszerkezete ( PDB  4W1Y ) Kulcsadatok
EK sz. EK 4.1.99.1
CAS-szám 9024-00-4
Kofaktor (ok) K + , PLP
Enzimaktivitás
IUBMB IUBMB bejegyzés
IntEnz IntEnz nézet
BRENDA BRENDA bejárat
KEGG KEGG bemenet
MetaCyc Metabolikus út
PRIAM Profil
EKT Szerkezetek
MEGY AmiGO / EGO

Az enzimológiában a triptofanáz egy liáz, amely katalizálja a kémiai reakciót  :

L -triptofán + H 2 O    indol + piruvát + NH 3.

Ez az enzim részt vesz a termelés az indol által dezaminálás a triptofán , egy proteinogén aminosav .

Mikrobiológia

Az indol előállítása az egyik klasszikus reakció, amelyet a mikrobiológiában a baktériumok osztályozására használnak.

Műszaki

A leggyakrabban használt táptalaj az "Urea-indol" táptalaj, amelyet karbamid-triptofánnak kell nevezni. Karbamidot, triptofánt, vörös fenolt és vizet tartalmaz. Három keresésre használják: ureáz jelenléte, triptofán-deamináz (TDA) jelenléte, triptofanáz jelenléte. Bőségesen beoltjuk steril vízben lévő szuszpenzióból vagy közvetlenül telepekből szilárd táptalajon.

Körülbelül 24 órás inkubálás után az ureáz közvetlen leolvasását a reagensek hozzáadása, az indol kimutatására szolgáló Kovács-reagens és a TDA kimutatásához a vas-klorid hozzáadása előtt végezzük. A Kovács-reagens szerves oldószerben (pentan-1-ol) van kevésbé sűrű, mint a víz: ezért gyűrűt képez a felületen, amely az indol jelenlétében vörössé válik, és egyébként sárgás marad.

Az api20 E galéria használata lehetővé teszi az indol előállításának kiolvasását a Kovács vagy a James reagenssel is. A táptalaj csak triptofánt tartalmaz


Eredmények

A laktóz + Enterobacteriaceae közül az Escherichia coli a leghíresebb indolgyártó. Mások úgy állítják elő, mint a Klebsiella oxytoca .

Megjegyzések és hivatkozások

  1. (a) A. Kogan, L. Raznov, NY Gdalevsky R. Cohen-Luria, O. Almog, AH Parola és Y. Goldgur , Structures of Escherichia coli triptofanáz a holo holo and` félig 'formái  ' , Acta Crystallogra szakasz F , vol.  F71, n o  Pt 3, 25760702, 2015. március, P.  286–290 ( PMCID  4356303 , DOI  10.1107 / S2053230X15000850 , online olvasás )
  2. Jean-Noël Joffin és Guy Leyral, Műszaki mikrobiológia: Technikák szótára , Bordeaux, CANOPÉ hálózat - CRDP d'Aquitaine,2014, 368  p. ( ISBN  978-2-86617-515-3 )