Fluoreszcens marker PCR-ben

Számos fluoreszcens markert alkalmaznak a PCR-ben ( polimeráz láncreakció ).

Történelmi

Az egyértelműség kedvéért a dátumok megfelelnek az első publikációnak a terepen, és csak az első szerzőket idézik, a teljes hivatkozások a "bibliográfia" fejezetben találhatók.

• 1880  : Hueppe F. első szintetikus táptalaj fluoreszcens mikroorganizmusok számára.
• 1964  : A BET-hez társított DNS fluoreszcenciával történő kimutatása Lepecq JB-vel.
• 1972  : Első DNS-vándorlás elektroforézis gélen, Aaij C.
• 1986  : Kary Mullis első nyilvános publikációja a PCR-ről (kémiai Nobel-díj 1993-ban).
• 1989  : A PCR termék első kimutatása BET segítségével (és nem radioaktivitással) Xu ZD-vel.
• 1992  : Valós idejű PCR feltalálása Higuchi R. által
• 1994  : A SYBR Green I szabadalmaztatása molekuláris szondákkal.
• 1995  : A SYBR green első alkalmazása PCR-termék kimutatására Schneeberger C.
• 1995  : Hidrolízisszondák feltalálása Livak KJ által.

Nem specifikus markerek

DNS interkalánsok

Kisebb horonyjelzők

Aszimmetrikus cianidrinek

Specifikus szekvencia markerek

Hibridizációs szondák

Hidrolízis szondák

A próbát egy donor ( fluoreszcein , amelynek gerjesztési hullámhossza 530 nm) és egy "kioltó" alkalmazásával állítjuk elő, amelyet egy polinukleotidra oltunk be, amely komplementer a kérdéses DNS-szekvenciával.

Molecular Beacons szondák

Scorpions szondák

Bibliográfia

Francia bibliográfia

• Hueppe F. Tanulmányok a kék tejről. Cohn Beiträge zur Biologie der Pflanzen. 1880; 3

• Lepecq JB, Yot P, Paoletti C. Interakció az etidium-hidrobromid (BET) és a nukleinsavak (AN) között. Spektrofluorometriai vizsgálat. [Az etídium-bromhidrát (BET) és nukleinsavak (NA) kölcsönhatása. Spektrofluorimetriás vizsgálat.] CR Hebd Seances Acad Sci. 1964; 259: 1786-9.

• Poitras E, Houde A. Valós idejű PCR: alapelvek és alkalmazások. Vélemények a biológiában és biotechnológiában (Kanada). 2002; 2 (2): 2-11

• Tsé C, Capeau J. A nukleinsavak mennyiségi meghatározása valós idejű kvantitatív PCR-rel. Ann Biol Clin (Párizs). 2003; 61 (3): 279–93

Angol bibliográfia

• Aaij C, Borst P. A DNS gélelektroforézise. 1972. Biochim Biophys Acta. Május 10.; 269 (2): 192-200.

• Higuchi R, Dollinger G, Walsh PS, Griffith R. Specifikus DNS-szekvenciák egyidejű amplifikációja és detektálása. 1992. Biotechnológia; 10: 413–7.

• Livak KJ, Flood JA, Marmaro J, Giusti W, Deetz K. Oligonukleotidok fluoreszcens festékekkel a szemben lévő végén adnak egy kioltott szondarendszert, amely hasznos a PCR-termék és a nukleinsav-hibridizáció detektálására. 1995. PCR Methods Appl. 4: 357-362.

• Mullis K, Faloona F, Scharf S, Saiki R, Horn G, Erlich H. A DNS specifikus enzimatikus amplifikációja in vitro: a polimeráz láncreakció. Hideg tavaszi Harb Symp Quant Biol. 1986; 51 Pt 1: 263-73.

• Schneeberger C, Speiser P, Kury F, Zeillinger R. A reverz transzkriptáz-PCR termékek kvantitatív kimutatása új és érzékeny DNS-festéssel. 1995. PCR Methods Appl. Február; 4 (4): 234-8.

• Xu ZD, Yu YJ, Hsie AW, Caskey CT, Rossiter B, Gibbs RA. Deléciós szűrés a hipoxantin-guanin foszforiboziltranszferáz lókuszon kínai hörcsög sejtekben a polimeráz láncreakció segítségével. 1989. Teratog Carcinog Mutagen; 9 (3): 177-87.